电泳和转印是两个不同的实验;前者是在电泳槽中通过蛋白电泳把目的蛋白在凝胶中和其他杂蛋白尽量分离开来;后者是把凝胶中的目的蛋白在转印槽中转印到PVDF膜或NC膜的过程。前者的核心配件是电泳芯,后者的是转印框,因此核心配件不通用,不过上盖和下槽是可以通用的。 具体产品信息: https://www.biotides.com/Productcategory/info_itemid_150_lcid_33_pid_4.html https://www.biotides.com/Productcategory/info_itemid_171_lcid_40_pid_3.html
如果只是做蛋白定性鉴定,三种厚度(0.75、1.0和1.5mm)都可以。 如果后续实验做到WB,IP等则用1.0和1.5mm的更多。 如果根据上样体积,则以下参数可供参考: 0.75mm厚度可上样40ul 1.0mm厚度可上样60ul 1.5mm厚度可上样100ul 注:以上数据只适用于biotide和伯乐电泳玻璃板及同型玻璃板。
跑完电泳后,玻璃板需要及时清洗干净,把缓冲液和残胶都清洗干净后,用双蒸水或者超纯水冲洗玻璃板表面,晾干备用。 需要注意的是不干净的玻璃板尤其是表面有残胶或者有污渍会影响胶的形成和产生不规则气泡。
根据制胶厚度,博泰斯电泳玻璃板有3种:0.75,1.0mm,1.5mm 适配伯乐和国内同型号电泳槽
biotides转印滤纸厚度为1mm,大小为100*75mm;湿转时正负极各1张即可。
博泰斯转印滤纸厚度为1mm,用后清洗、铺平晾干;可重复3次。
在Westernblot的转膜过程中,转膜滤纸的作用是为转印“三明治”提供平整的接触面,使胶和膜接触均匀,结果更趋稳定真实。
博泰斯三色预染marker一共有11条带,10-250kDa,一种70kDa处是红色,25kDa处是绿色,其余条带都是蓝色。 详见:https://www.biotides.com/Productcategory/list_lcid_22_pid_4.html
博泰斯的蛋白maker依据胶厚度和齿孔大小推荐1.5-3ul为宜。
用伯乐制胶架(或类似制胶架)配胶时,时有漏胶现象发生,是电泳玻璃板底部与制胶垫之间密闭不够导致下层胶漏出。 原因有以下几种 1 WB玻璃板底部有缺口 2 制胶垫用太久、老化疏松 3 制胶底座上面夹子的弹簧松动 针对上述原因逐一排查即可找到解决办法。
博泰斯一步法制胶试剂盒2分钟制胶,18分钟凝固
一共有4个浓度:7.5%、10%、12.5%和15%

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