【货号规格】
WB1601: 10 ml
【产品特点】
快速—— 5分钟快速完成封闭。
可靠——无蛋白配方,与抗体无交叉反应。
应用广——无磷酸化蛋白,无生物素,尤其适合磷酸化特异抗体及生物素检测系统。
高效——只结合封闭膜而不结合蛋白,因此不会屏蔽样品蛋白的抗体识别位点,与传统的牛奶和BSA封闭相比信噪比更高。
节省抗体——使用本封闭剂后,所需的最适抗体浓度低于常规使用浓度,可大大节省抗体使用量。
快速封闭液原理:在WB实验中,封闭是指用与后续实验不发生作用的介质对PVDF膜或者NC膜上没有结合目的蛋白的区域通过作用力结合占据空间以达到物理阻隔的效果。封闭的目的是防止一抗或二抗和转印膜的非特异性吸附,降低或消除背景,以得到更好、更真实的实验结果。
【产品说明】
本快速封闭液专为快速高效封闭western blotting膜而设计。所含封闭剂无动物来源蛋白成分,避免了抗体与封闭剂的非特异结合,最大程度地降低了背景。同时,本封闭剂无内源的磷酸化蛋白及生物素,对磷酸化特异抗体及生物素检测也不会产生干扰。本封闭剂不与蛋白产生非特异性结合,因而只封闭膜而不会屏蔽样品蛋白的抗体识别位点,大大提高了抗体检测灵敏度。实验表明,本封闭剂对许多抗体都有不同程度的信号增强作用。然而这种信号增强作用因抗体而异,对某一特定抗体,并不一定具有确定的信号增强作用。
需要注意的是,没有任何一种封闭剂能适合所有抗原和抗体的检测系统。如出现本试剂不适合的抗体,请替换使用其他种类的封闭剂如BSA或脱脂奶粉等。
【封闭方法】
a. 转膜结束后,将转印膜放入到杂交孵育盒中,加入10-20ml TBS/T或PBS/T。
b. 往TBS/T或PBS/T中加入1/100体积的快速封闭液,置于摇床轻轻摇动,室温封闭5分钟(即配即用)。
c. 用TBS/T或PBS/T稀释抗体继续进行下一步抗体杂交孵育。
注意:由于本封闭剂和传统基于蛋白成分的封闭液的原理不同,建议在整个western blotting过程中尽量不要使用BSA或脱脂奶粉等基于蛋白成分的封闭液来稀释抗体和洗膜等,以充分发挥本封闭剂对信号的增强作用。
快速封闭液100× 无蛋白快速封闭液 WB快速封闭液