【产品简介】
本产品品质稳定,最大的特点是电泳后可立即观察电泳条带;并已配套提供改良型APS催化剂溶液,提高了APS溶液的稳定性和催化效能。请将此APS溶液保存于-20℃。为方便吸取使用,已开盖使用中的APS溶液可置于4℃保存至少3个月。
【货号规格】
WB2301: 可制备125个7.5%的mini免染胶(0.75mm)
WB2302: 可制备125个10%的mini免染胶(0.75mm)
WB2303: 可制备125个12.5%的mini免染胶(0.75mm)
WB2304: 可制备125个15%的mini免染胶(0.75mm)
【产品内容】
下层胶缓冲液(2×)250ml 下层胶溶液(2×)250ml 上层胶缓冲液(2×)80ml 上层胶溶液(2×)80ml 改良型APS溶液8ml
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◎免染成像—电泳结束后,放置紫外透射仪或凝胶成像上即可见蛋白条带,无需考染
◎一步法制胶—上下层胶可同时灌制,下层胶灌完可立即灌入上层胶,无需用水或醇封胶
◎快速制备凝胶—最少只需2分钟制胶操作,15-18分钟凝固
◎彩色上层胶—红色上层胶,方便点样
◎避免有异味的试剂—没有TEMED,避免恶臭气味
【制胶流程】
(以一块0.75/1.0/1.5mm的mini免染胶为例)
1. (准备15ml离心管)取等体积 下层胶缓冲液 和 下层胶溶液 混匀,即取两种溶液各2.0/2.7/4.0ml。
2. (准备15ml离心管)取等体积 上层胶缓冲液 和 上层胶溶液 混匀,即取两种溶液各0.5/0.75/1.0ml。
Tips:Ⅰ:此4种组分平时使用时可放室温;长时间(比如超过一星期)不用情况下可放4℃,从4℃取出时先在室温平衡30分钟以上再吸液配制,以避免凝胶产生气泡。
Ⅱ:吸液前请摇匀。
3. 往步骤1中的混合溶液中加入40/60/80μl的改良型APS溶液,混匀,灌下层胶;使其液面距离电泳梳子前沿大约0.5cm即可。
Tips:Ⅰ:此溶液为过量,请勿全部灌完。
Ⅱ:加入改良型APS溶液后,轻缓混匀;或用1ml移液器或滴管在液面下轻轻吸放混匀;混匀后立即灌胶。
4. 灌完下层胶后,可立即往步骤2中的混合溶液中加入10/15/ 20μl的改良型APS溶液,混匀,灌上层胶;(需要注意的是灌制上层胶时建议用枪头左右平移,不是集中在一个位置灌制),插入电泳梳子。
Tips:Ⅰ:灌上层胶时建议用枪头左右平移缓慢注入,不是集中在一个位置灌制。
Ⅱ:加入改良型APS溶液后,轻缓混匀;或用1ml移液器或滴管在液面下轻轻吸放混匀;混匀后立即灌胶。
5. 待胶凝固后(15-18分钟),拔去梳子即可电泳。
Tips:Ⅰ:胶凝固后上下层胶分界线没有传统胶或两步法操作明显,但对电泳过程和结果没有影响。
Ⅱ:为了分界线更平整明显,请在制胶前清洗并擦拭干净玻璃板。
6. 电泳结束后,如需 观察蛋白条带,可将凝胶从玻璃板中取出,放置紫外透射仪或凝胶成像上即可成像,无需考染。
Tips:Ⅰ:根据仪器功率不同,条带呈现速度略有差别,一般1-2分钟即可观察,5-10分钟可达峰值。
Ⅱ:建议将凝胶包裹于保鲜膜内,以防止凝胶破损。
【凝胶浓度选择】
以下是不同胶浓度下三色预染蛋白marker的泳动示意图;也可作为凝胶浓度选择参考。
又称:免染胶|一步法免染|免染page胶|免染PAGE胶制备试剂盒